miRNA（microRNA）是一类极具有生物学意义的小非编码RNA分子，是通过调控、抑制等方式参与到基因表达调控中的重要调控因子。为了更好地研究miRNA的作用以及miRNA在生物过程中起重要作用，miRNA测序成为了一种相对精确的测序方法。
miRNA测序是基于链特异性催化的化学反应原理，它以miRNA的特异序列为基础，通过文库构建、建库技术及测序技术，对miRNAs进行全面而准确的检测和探索。首先，miRNAs在测序之前要经过文库构建的步骤，包括文库建设、稳定性验证、抗冲实验等。在文库构建的过程中，我们将载体、特异引物以及添加复合物组装在一起，以构建miRNA链特异性的探针文库，可以对miRNA结合成功与否造成影响。此外，我们还要对文库进行标准化处理，以进行有效的测序。
随后，样品被加入到探针文库中，并且和探针文库结合，当特异性的miRNA序列和预先设定的探针进行结合时，就会产生反应，最终形成miRNA PCR反应混合物。接着，通过循环扩增的方式，形成后续的miRNA模板及数据统计；最后，miRNAs模板进入以分析测序管线，包括深度分析、功能分析、聚类分析等，最终完成miRNA的测序工作。
miRNA测序经过几十年的不断的发展，除了基本的基因调控、表达能力研究外，miRNA测序也被广泛应用于肿瘤细胞研究中，有助于揭示肿瘤发生与发展的机理，为临床诊断及治疗提供有力依据，为当前的研究发展提供支持。此外，miRNA测序也可以广泛应用于农业生物学、免疫学和植物信号转导等领域。
miRNA测序从原理到应用，技术不断精进，日新月异，能够获取更好的结果；未来，将发挥出更大的作用。
